Противірусні властивості офіцінальних препаратів декаметоксину, етонію та унітіолу по відношенню до вірусів грипу та простого герпесу: дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук

Abstract

Дисертація присвячена виявленню та дослідженню противірусної активності офіцінальних препаратів декаметоксину, етонію та унітіолу щодо збудників вірусних інфекцій - грипу та герпесу in vitro та in vivo, а також встановленню деяких механізмів їх противірусної дії. Вперше встановлено, що декаметоксин, етоній та унітіол гальмують репродукцію вірусів грипу людини серотипів А (серопідтипи H1N1 та H3N2) і В у чутливих клітинах, пригнічуючи протеолітичні процеси на найбільш ранніх етапах взаємодії вірусів з чутливими клітинами. Вперше виявлено, що ці препарати гальмують також репродукцію вірусів грипу птахів з гемаглютинінами H5 і H7 у культурі тканини хоріоналантоїсних оболонок курячих ембріонів. Вперше встановлена захисна дія унітіолу при інтраназальному його введенні за профілактичною та лікувально–профілактичною схемами при моделюванні експериментального грипу у білих мишей. Інтраназальне застосування декаметоксину та етонію за профілактичною, лікувально- профілактичною та лікувальною схемами статистично значуще знижувало загибель інфікованих тварин. Виявлена активність декаметоксину, етонію та унітіолу у відношенні до ВПГ-1 та ВПГ-2.

The work is dedicated to studying antiviral activity of such medicines as decamethoxine, aethonium and unitiolum against influenza and herpes simplex viruses (HSV) both in vitro and in vivo and some mechanisms of there activity. Unitiolum, aethonium & decamethoxine have inhibited the reproduction of influenza human viruses strains A/Hong Kong/1/68 (H3N2), A/PR/8/34 (H1N1), В/Leningrad/17/86 viruses and avian influenza H5N3&H7N3 in the tissue culture of 11-14-days ages chicken embryos' choryoallantoic membranes (CAM). It was shown that this preparation decreasing proteolytic activity of the purified and concentrated A/PR/8/34 influenza viruses, of CAM plasmatic membranes and virus-membrane complexes in vitro. So, preparations inhibit the proteolysis increasing that take place during virus-membrane interaction. Intranasal application of all studied preparations in different schemes considerably decreased mortality of infected with influenza virus mice. Decamethoxine, aethonium and unitiolum show anti-herpetic activity in vitro.

Диссертация посвящена выявлению и изучению противовирусной активности официнальных препаратов декаметоксина, этония и унитиола в отношении возбудителей вирусных инфекций - гриппа и герпеса in vitro и in vivo, а также установлению некоторых механизмов их противовирусного действия. Впервые установлено, что известные катионные поверхностно активные бис-четвертичные соли аммония – декаметоксин и этоний тормозят репродукцию вирусов гриппа человека серотипов А (сероподтипы H1N1 и H3N2) и В, подавляя протеолитические процессы на ранних этапах взаимодействия вируса гриппа с плазматическими мембранами чувствительных клеток. Впервые выявлено противовирусное действие препарата унитиол, который используется в медицинской практике как антидот, в отношении вирусов гриппа человека серотипов А (сероподтипы H1N1 и H3N2) и В in vitro в культуре ткани хорион-аллантоисных оболочек (ХАО) куриных эмбрионов. Унитиол снижает энзиматическую активность вируса, мембран и вирус-мембранного комплекса, тормозя протеолитические процессы на ранних этапах взаимодействия вируса гриппа с чувствительной клеткой. Снижение протеолитической активности при вирус-мембранных взаимодействиях в присутствии препаратов является одним из механизмов реализации их противовирусных свойств. Впервые установлено, что официнальные препараты декаметоксин, этоний и унитиол тормозят репродукцию вирусов гриппа птиц с гемагглютининами H5 и H7 в культуре ткани ХАО. Впервые выявлено защитное действие декаметоксина и этония при интраназальном способе их введения по профилактической, лечебно- профилактической и лечебной схемам на модели экспериментального гриппа у белых мышей. Интраназальное применение унитиола при профилактической и лечебно-профилактической схемах на модели экспериментального гриппа у белых мышей защищало животных от гибели. Интраназальное использование препаратов при экспериментальном гриппе приводило к снижению уровня протеолитической активности щелочных протеаз и титра инфекционного вируса в легких мышей. Выявлено, что декаметоксин и унитиол тормозили репродукцию вируса простого герпеса (ВПГ) 1 типа на культуре первично- трипсинизированных куриных фибробластов, хотя индекс селективности их был невысок по сравнению с ацикловиром (референс-препарат). Этоний на этой модели в нетоксичных дозах был неэффективным. На перевиваемой культуре клеток Нер-2 декаметоксин в сопоставимых с ацикловиром дозах тормозил процесс формирования вирус-специфических внутриядерных включений, но в 1,9 раз меньше. Это свидетельствует о возможном влиянии препарата на такие этапы репродукции ВПГ-1, как проникновение вируса в клетку и репликацию вирусной нуклеиновой кислоты, что объясняется химической природой декаметоксина, который является поверхностно активным веществом. Унитиол и этоний в нетоксичных для клеточной культуры Нер-2 дозах были неэффективны. В отношении ВПГ-2 на перевиваемой культуре клеток RK13 этоний и унитиол проявили более высокую активность. Индекс селективности препаратов составил 33 и 66,6 соответственно. По сравнению с ацикловиром эти показатели были в 6 и 3 раза ниже. Индекс селективности декаметоксина был ниже из-за незначительной разницы между максимально переносимой и минимальной эффективной дозами, но торможение репродукции ВПГ-2 на культуре RK13 было регулярным, что свидетельствует о наличии у этого препарата противовирусных свойств. Таким образом, исследуемые препараты декаметоксин, этоний и унитиол обладали противовирусными свойствами в отношении вирусов герпеса 1 и 2 типов, но их активность была ниже, чем у ацикловира.